mtt实验技术服务的简单介绍

MTT法原理和步骤 一原理 MTT法，即甲基四唑溴化物法，常用于细胞毒性实验和增殖检测其原理在于活细胞中的线粒体脱氢酶能将黄色的MTT还原成蓝紫色的甲瓒，沉积在细胞中通过检测甲瓒的量，可以反映细胞的活性活细胞越多，代谢越旺盛，还原出来的甲瓒就越多相反，如果细胞受到毒性损伤，细胞的活性。

本文介绍如何使用GraphPad Prism 8软件计算MTT比色实验中的IC50值在MTT筛选药物活性过程中，需对数据进行标准化和非线性回归分析以一组数据为例，通常在相同浓度下铺5个复孔，并选取三组数值相差不大的数据进行计算避免选取最大值和最小值，以提高数据的可靠性首先，打开GraphPad Prism 8软件将。

MTT和克隆形成试验均可以用来测定细胞的存活率，计算IC50，但MTT法更常见 但克隆形成法有很多不足，表现在1难获得真正的单细胞悬液 2集落形成效率低 3确定是否形成集落有难度，一般认为50个细胞以上4耗时太长，容易污染MTT法相比克隆来说，具有如下有点1适用性广 2试验周期短 3。

关键是看你的试验中，血清里面的成分会不会干预实验结果和加药处理的时间吧干预的话就需要换成无血清的培养基，通常还要在换之前洗个12次，完全去除血清，如果加药的时间很长，长期的无血清细胞会因为饥饿而状态不好，可以考虑换成无血清的其它悬浮培养基处理吧当然如果血清的影响不大，就用完全。

在进行MTT实验时，如果需要连续观察13天的细胞生长情况，建议按以下方式进行操作第一天只铺一个孔，以确保细胞有足够的空间生长第二天再铺一组孔，这样可以同时观察12天和23天的细胞生长情况第三天再铺一组孔通过这种方式，到第四天时，板上的孔中将有13天不同生长阶段的细胞如果。